El estudio de eucariotas ciliados ofrece un método simple y versátil para la tinción de tubulina

Los ciliados, un grupo de eucariotas ciliados unicelulares, se han estudiado desde la aparición de la microscopía óptica, con más de 10.000 especies descritas. Los cilios son la principal característica de los ciliados y contribuyen a su diversidad. Varían en longitud y cubren la superficie celular o partes específicas, o pueden agruparse para formar cirros. La tinción de los cilios y los cuerpos basales es un procedimiento común en la investigación de la morfología de los ciliados, utilizando técnicas como la impregnación con plata y la tinción por inmunofluorescencia con anticuerpos asociados a tubulina.

Los colorantes de tubulina de células vivas, comúnmente utilizados en células humanas, requieren reactivos de permeabilización celular para ingresar a las células. Sin embargo, estos reactivos son ineficaces sobre los ciliados. En las células ciliadas, los tintes generalmente se ingieren mediante fagocitosis y terminan en orgánulos rodeados de membranas, lo que plantea un desafío en la administración del tinte.

En un estudio Publicado en el diario Biología y seguridad del aguaUn equipo de investigadores de China ha desarrollado un método simple y adaptable para la tinción de tubulina/cilias que produce excelentes resultados en ciliados.

«Nuestro método implica utilizar tintes de tubulina de células vivas para teñir las células ciliadas fijas, lo que presenta una opción muy eficiente y práctica para la investigación del cabello», dice el autor principal Tingting Pan. «Además, permite una integración perfecta de la tinción por inmunofluorescencia con anticuerpos cuando es necesario».

Este nuevo método de tinción con tubulina ofrece a la comunidad de investigación de ciliados cuatro ventajas importantes.

1. Impulsa los estudios de biología celular en ciliados, particularmente la investigación sobre el citoesqueleto, ya que los citoesqueletos de tubulina prevalecen en estos organismos.
2. Simplifica el proceso de tinción, beneficiando los estudios de morfología y taxonomía y haciéndolo accesible a la mayoría de los laboratorios de taxonomía de ciliados.
3. Cuando se combina con la microscopía confocal, el método permite la exploración detallada de los patrones basales del cuerpo (características taxonómicas cruciales) utilizando solo unas pocas células y evitando las complejidades de los métodos tradicionales de impregnación con plata.
4. Los estudios ecológicos de ciliados pueden beneficiarse de este método.

«La flexibilidad del método permite la tinción de poblaciones de células mixtas de ambientes acuáticos, después del enriquecimiento utilizando una red de plancton», agrega Pan. «A medida que avanzan las imágenes de fluorescencia de alto rendimiento, nuestro método de tinción puede integrarse perfectamente con el aprendizaje automático. sistemas de clasificación debido a su capacidad para generar imágenes con fondos claros”.